Genetic analysis of familial Alzheimer’s disease, primary lateral sclerosis and paroxysmal kinesigenic dyskinesia: a tool to uncover common mechanistic points

Las enfermedades neurológicas pueden tener un amplio espectro de fenotipos, causando interrupciones en las actividades de la vida diaria y, a menudo, una enfermedad progresiva que termina en la pérdida de la vida. Los mecanismos moleculares que subyacen a muchas de estas enfermedades pueden tener vías comunes y, dependiendo del gen en cuestión, su disfunción puede llevar a una variedad de condiciones. La enfermedad de Alzheimer (EA) es la demencia neurodegenerativa más común en el mundo, con una estimación de 50 millones de personas que viven con demencia en todo el mundo. Los síntomas de la EA incluyen dificultad para recordar nombres o eventos recientes, apatía, depresión , desorientación, confusión, dificultad de hablar, caminar y tragar. La división canónica de la EA en inicio temprano (EOAD por sus siglas en inglés) e inicio tardío (LOAD por sus siglas en inglés) se establece en los 65 años de edad. Ambos se caracterizan por agregados de proteína tau hiperfosforilada intracelular llamados ovillos neurofibrilares (NFT por sus siglas en inglés) y placas seniles extracelulares compuestas principalmente por grupos de péptido amiloide-β (Aβ). La patología de EA comienza en la corteza entorrinal, una región del lóbulo temporal medial, y causa la muerte de las neuronas provocando la atrofia del tejido cerebral. La EA es una enfermedad multifactorial con un patrón de herencia dicotómico. Aproximadamente el 70 % de las causas son genéticas y el resto ambientales. Mutaciones en los genes: APP, PSEN1 y PSEN2, son las causas más comunes de EOAD y el alelo ε4 de APOE es un factor de riesgo bien establecido de LOAD. Tres vías principales contienen la mayoría de los factores de riesgo genéticos de EA: la respuesta inmune, el metabolismo lipídico y la endocitosis. Entre los genes involucrados en la respuesta inmune, CR1 se ha asociado con la EA mediante estudios de asociación de todo el genoma (GWAS por sus siglas en inglés). CR1 forma un parte importante del sistema del complemento y es significativo para este trabajo. Una isoforma de CR1, CR1*2, se expresa en niveles más bajos que la isoforma CR1*1 y se especula que provoca un menor aclaramiento de Aβ y una desregulación del sistema del complemento. La esclerosis lateral primaria (ELP) se considera una parte del espectro patológico de la esclerosis lateral amiotrófica (ELA). La ELA, aunque se considera una enfermedad rara, es la enfermedad de la neurona motora (ENM) más común. La ELP se caracteriza por la espasticidad espinobulbar causada por la degeneración de las neuronas motoras superiores (NMS), mientras que la ELA se caracteriza por la degeneración tanto de las NMS como de las neuronas motoras inferiores (NMI) a nivel espinal y bulbar, lo que causa parálisis de las extremidades, disartria, disfagia y muerte por insuficiencia respiratoria. Características clínicas de ELP incluyen la espasticidad, ligera debilidad en las extremidades inferiores, inicio en adultos, curso progresivo, duración de más de 4 años y los síntomas seudobulbares. Los déficits cognitivos y conductuales pueden ocurrir con ELA, que van desde la demencia leve, moderada a la demencia frontotemporal (DFT) que también se observó en pacientes con ELP. La base genética de la ELP no se conoce bien, aunque se conocen mutaciones en los genes SPG7 y TBK1 en pacientes afectados por ELP familiar. Las mutaciones en el gen SOD1, que codifica una enzima antioxidante, y en la proteína codificada por el gen C9orf72 son las causas más comunes de ELA. La patogenia de la ELA puede ser causada por excitotoxicidad del glutamato, disfunción mitocondrial, alteración de la estructura o transporte en los axones y estrés oxidativo. La discinesia paroxística cinesigética (PKD por sus siglas en inglés), el trastorno del movimiento paroxístico más común, se caracteriza por una variedad de movimientos involuntarios desencadenados por movimientos repentinos. Con inicio en la niñez o adolescencia, sus características clínicas incluyen ataques recurrentes que involucran corea, atetosis, posturas distónicas o balismo. La gravedad de estos ataques suele disminuir con la edad. Las mutaciones en el gen PRRT2 son, hasta ahora, la única causa conocida de este trastorno. Se sabe que PRRT2 interactúa con las proteínas SNAP-25, SYT1 y SYT2 en la membrana presináptica de las neuronas, que participan en la señalización en las células nerviosas. La falta de PRRT2, a menudo causada por la vía de degradación del ARN mensajero mediada por mutaciones terminadoras (NMD por sus siglas en inglés), debido a codones de terminación prematura (PTC por sus siglas en inglés) en el transcripto, es el mecanismo molecular común involucrado en la haploinsuficiencia que causa PKD. Objetivos El objetivo principal de este trabajo es comprender la etiopatogenia de tres enfermedades neurológicas que afectan a tres familias españolas distintas y estudiar los mecanismos genéticos y moleculares que afectan a estas enfermedades.   Materiales y métodos Se recogieron muestras de ADN de miembros de tres familias españolas: UGM037 (11 individuos) afectados por EA, UGM471 (7 individuos) afectados por ELP y UGM478 (7 individuos) afectados por PKD. También se dispone de una población de control de individuos sanos y otra de individuos afectados por EA disponible. Las muestras se recogieron con la aprobación de los Comités de Ética en la Investigación de los hospitales correspondientes con el consentimiento informado firmado por los pacientes. La cepa bacteriana utilizada para todas las manipulaciones necesarias fue Escherichia coli DH5α y la línea celular humana fue SH-SY5Y. La secuenciación del exoma completo (WES por sus siglas en inglés) se utilizó como herramienta para identificar variantes dentro del exoma de los pacientes. A través de “base-calling” y análisis de imágenes, alineación de lectura y “SNP calling”, los datos podrían transformarse en una base de datos viable de variantes. Se utilizó el filtrado y la priorización seguida de la validación de secuenciación de Sanger de los resultados para identificar las variantes más interesantes, posiblemente involucradas en la causa de las enfermedades. Para la evaluación de variantes se utilizaron bases de datos públicas como Collaborative Spanish Variant Server (CSVS) o Genome Aggregation Database (gnomAD). La frecuencia de la variante también se verificó mediante PCR específica de alelo (ASPCR por sus siglas en inglés) realizada en las poblaciones de control. Después de identificar las variantes más interesantes, se realizaron manipulaciones de plásmidos para obtener ADNc, correspondientes a secuencias de los genes con estas variantes, en vectores de expresión específicos. Se utilizó mutagénesis dirigida para la introducción de variantes de un solo nucleótido (SNV por sus siglas en inglés), el epítopo FLAG y sitios de restricción enzimática. La subclonación se utilizó para transferir ADNc específicos a los correspondientes vectores de expresión. El análisis in silico se realizó utilizando los servicios web HOPE, I-Mutant 2.0 y ConSurf. De esa forma se pudo establecer la influencia de una variante específica en la función y estabilidad de la proteína. También el grado de conservación de los residuos. En el caso de genes implicados en la EA, conocer los genotipos de APOE y CR1 es importante y se realizó mediante PCR. En el caso de APOE, la PCR fue seguida por restricción enzimática y análisis del patrón de bandas en un gel de agarosa. En el caso de CR1, la PCR fue seguida por secuenciación de Sanger o análisis de presencia o ausencia de bandas en un gel de agarosa. Las células SH-SY5Y se mantuvieron en un medio de crecimiento completo y se utilizó el reactivo de transfección Lipofectamine 2000 para transfectarlas con plásmidos correspondientes a experimentos específicos. Un experimento consistió en comparar los niveles de ARNm y proteínas de genes específicos afectados por las variantes identificadas. En otro, se realizó la misma comparación después de la inhibición de la vía NMD, usando NMDI14. Para medir los niveles de ARNm, se extrajo el ARNm de células SH-SY5Y transfectadas después de aproximadamente 48h de incubación y se obtuvo el ADNc mediante retrotranscripción. Estos se utilizaron en PCR cuantitativa (qPCR por sus siglas en inglés) con cebadores diseñados específicamente para amplificar el producto de la transcripción reversa con controles apropiados. Para medir los niveles de proteína, las proteínas se extrajeron de las células SH-SY5Y transfectadas después de aproximadamente 48h de incubación y se usaron para el análisis por Western Blot (WB). El gen constitutivo de actina se utilizó como control. Para el análisis funcional de las distintas variantes de ADPRH, las proteínas se extrajeron de las células SH-SY5Y transfectadas y se sometieron a purificación utilizando una columna de afinidad de proteínas marcadas con GST. Después de la diálisis y concentración de la muestra, las proteínas podrían usarse para un ensayo de actividad. Esto implicó la ADP-ribosilación del sustrato por la toxina del cólera (CT) seguida de la hidrólisis de este enlace por ADPRH y sus variantes. Las muestras se cargaron luego en una columna de cromatografía líquida de ultra rendimiento (UPLC por sus siglas en inglés) que permitió la separación, identificación y cuantificación de los componentes basándose en los datos de un detector que mide la absorbancia a 260 nm. También se utilizó co-inmunoprecipitación con extractos de proteínas de células SH-SY5Y cotransfectadas con ADPRH y ADPRHL1 para determinar si tiene lugar la interacción proteína-proteína. El análisis estadístico se realizó utilizando la prueba t de Student y ANOVA unidireccional o bidireccional para comparar las diferencias entre las medias de los grupos, con una prueba post hoc de Tukey de comparaciones múltiples de medias. Se utilizó el software R para realizar las pruebas. Resultados y discusión La filtración, priorización y validación mediante secuenciación Sanger identificó la variante rs764542666 en el gen CR1 que codifica un PTC c.C406T p.R136* (CR1R136*) como la causa probable de EA en la familia UGM037. Los datos clínicos sugirieron LOAD en la familia, que estaría más en consonancia con los factores de riesgo que con las mutaciones causales. Los miembros de la familia poseían el alelo APOE ε4, sin embargo, sorprendentemente, el análisis de la familia reveló que un miembro con un genotipo APOE ε4/ε4 y una edad de 88 años no presentaba alteración cognitiva alguna. La variante CR1R136* segrega con la enfermedad en el pedigrí, y no aparece en ninguno de los miembros sin EA. Estudios anteriores mostraron que la isoforma CR1*2 de CR1, asociada con un mayor riesgo de LOAD, se expresaba menos que CR1*1. Según esto, el tránscrito de CR1R136* podría causar un efecto similar al activar el NMD y causar sí haploinsuficiencia. El estudio de los niveles de ARNm y proteínas reveló que CR1R136* se expresa en niveles más bajos que el tipo silvestre. Estos niveles aumentaron significativamente después del tratamiento con inhibidor de NMD, lo que sugiere la participación de esta vía en la degradaciódel transcrito CR1R136*. El genotipado de la isoforma CR1*2 y rs3818361 en CR1 en muestras de la familia UGM037, mostró que ninguno de ellos tenía isoforma CR1*2 y rs3818361 no se segregó con la enfermedad, no estando presente en ninguna de las muestras de pacientes. Ambos fueron genotipados, ya que se describieron previamente como asociados con la EA. La isoforma CR1*2, como se mencionó anteriormente, se expresa a niveles más bajos que CR1*1, por lo que posiblemente afecte un aclaramiento de Aβ más bajo y una desregulación del sistema del complemento. El rs3818361 fue genotipado para verificar si puede ser el verdadero culpable de la enfermedad, estando en desequilibrio de ligamiento con CR1R136*. Los hijos de los pacientes y el miembro de la familia sano, no fueron diagnosticados con EA, sin embargo, sus muestras de ADN se recolectaron entre las edades de 50 y 57. Pueden estar en riesgo de desarrollar la enfermedad a una edad posterior, especialmente porque todos excepto uno de ellos tenía una copia del alelo APOE ε4. Además, tres de siete de ellos tenían la variante CR1R136*. Aunque la sobreexpresión in vitro de una proteína en un modelo celular tiene sus limitaciones, el mecanismo molecular detrás de la EA en la familia UGM037 parece ser la haploinsuficiencia causada por la destrucción del transcripto CR1R136* por la vía NMD. Son necesarios más estudios funcionales sobre los efectos de CR1R136* y un seguimiento futuro de los miembros más jóvenes de la familia. Según mi conocimiento, CR1R136* (rs764542666) sería la primera mutación causante de EA conocida en el gen CR1. Los datos clínicos disponibles respaldaron el diagnóstico de ELP en miembros de la familia UGM471. A través de la priorización y filtración de datos de WES y la validación por secuenciación de Sanger, se identificaron dos variantes que posiblemente podrían causar los síntomas en la familia. Uno era una nueva variante c.G884C p.R295P en ADPRH (ADPRHR295P) y el otro era una mutación c.T497C p.L166P previamente descrita en PSEN1 (rs63750265; PSEN1L166P). Este último fue descubierto recientemente dentro del genoma de la familia UGM471, por lo que se discutirán cronológicamente, a partir del descubrimiento. La ADPRH es una proteína ubicua que se encuentra en el citoplasma de ratones y humanos. ADPRH hidroliza el enlace N-glicosídico entre la arginina y la ADP-ribosa, escindiendo la ADP-ribosa del sustrato en el ciclo de ADP-ribosilación. La reacción resulta ser específica para sustratos mono-ADP-ribosilados, debido a la estructura de la proteína. El ciclo de ribosilación de ADP es muy importante para la regulación celular. El variante ADPRHR295P se prevé que sea perjudicial por SIFT y Polyphen. No se encontró en ninguna base de datos pública y la secuenciación de Sanger confirmó su segregación con la enfermedad en el pedigrí de la familia UGM471. Sin embargo, dos individuos sanos de esta familia también portaban ADPRHR295P. La evaluación de la frecuencia de ADPRHR295P por ASPCR en la población de control, mostró que ninguno de los 196 individuos que no eran afectedos por ELP eran portadores. Se encontró que la arginina en la posición 295 en ADPRH era un residuo conservado y un cambio a una prolina podría afectar la función o estabilidad de la proteína de manera significativa. La reevaluación de los datos de WES mostró un parálogo de ADPRH, ADPRHL1 afectado por una variante ADPRHL1L294R, que también se predice que es perjudicial. Esta variante se segrega con la enfermedad en la familia, no estando presente en los individuos sanos. Se especula que ADPRH junto con ADPRHL1 están implicados en el ensamblaje de filamentos de actina y la modulación de la polimerización de actina puede estar implicada en la interrupción del transporte nucleocitoplasmático que es importante en la patogénesis de la ELA. Así, la variante ADPRHR295P puede tener una penetrancia baja, provocando la enfermedad solo en ciertos miembros de la familia, o puede ir acompañada de la variante ADPRHL1L294R, para afectar a los pacientes. La coinmunoprecipitación no mostró una interacción entre las dos proteínas, sin embargo, pueden funcionar al unísono sin una interacción directa. El ensayo de actividad para ADPRHR295P, donde se usó CT para ADP-ribosilar un sustrato y ADPRH de tipo silvestre (ADPRHWT) y sus variantes (ADPRHR295P y ADPRHD55A/D56A) se usaron para hidrolizar la ADP-ribosa, mostró que ADPRHR295P tenía una eficiencia de actividad similar a la del ADPRHWT. La variante ADPRHD55A/D56A, en la que se cambiaron los residuos esenciales del sitio activo, no mostró actividad hidrolasa. Aunque este ensayo no mostró disminución de la actividad de la variante ADPRHR295P, no tuvo en cuenta el posible efecto desestabilizador de la variante. El ensayo RT-qPCR para medir los niveles de ARNm de esta variante mostró que no variaban del tipo silvestre, sin embargo, los niveles de proteína medidos con WB demostraron ser significativamente más bajos que los del ADPRHWT o para otras variantes examinadas (ADPRHR295Q, ADPRHD55A/D56A). Solo la variante ADPRHR295* que se ha descrito previamente, demostró tener niveles de ARNm muy bajos y no pudo detectarse ninguna proteína. Esto sugiere que puede verse afectado por la vía NMD. Si bien es difícil decir si la variante de ADPRHR295P afecta la enfermedad en la familia UGM471, es importante conocer su fuerte efecto sobre la estabilidad de la proteína para el estudio adicional de la mono-ADP-ribosilación poco estudiada. La mutación c.T497 C p.L166P en PSEN1 (rs63750265) se descubrió recientemente en la familia UGM471. Aunque las mutaciones en PSEN1 comúnmente causan EOAD, ha habido informes que asocian PSEN1 con ELP y ELA. PSEN1A431E y PSEN1L381V son dos ejemplos de mutaciones asociadas con ELP y EA, que provocan un inicio temprano alrededor de los 40 años de edad. Se sabe que la mutación PSEN1L166P causa EA y paraparesia espástica a una edad temprana, siendo el primer caso encontrado en una niña de 15 años. También se encontró que otras mutaciones en la posición L166 en PSEN1 estaban asociadas con la EA (PSEN1L166V, PSEN1L166R (rs63750265), PSEN1L166H (rs63750265) y PSEN1L166del (rs63751458)). La mayoría de ellos se asociaron con deterioro cognitivo, aunque algunos se asociaron con síntomas motores. La mutación PSEN1L166P causa pérdida parcial de función de escisión de la γ-secretasa y aumenta la proporción Aβ42/Aβ40 mediante la reducción de los niveles de Aβ40. Además, PSEN1 funciona formando canales de fuga de Ca2+ del retículo endoplásmico (RE), y la mutación PSEN1L166P interrumpe esa función. El descubrimiento reciente de la mutación PSEN1L166P en la familia UGM471 no permitió una investigación más exhaustiva de sus efectos, pero se confirmó que se segrega con la enfermedad en el pedigrí. La naturaleza agresiva de esta mutación, la edad temprana de aparición y los síntomas motores, sugieren fuertemente que es PSEN1L166P el que causa la enfermedad en la familia. Si bien no está asociado con ELA ni ELP, los pacientes también pueden haber sido afectados por otros factores ambientales o genéticos para producir este fenotipo. Al mismo tiempo, existen informes de pacientes con ELP con mutaciones en PSEN1. O el efecto de las mutaciones de PSEN1 es lo suficientemente heterogéneo como para causar estos diferentes trastornos, los trastornos están mucho más relacionados debido a los mecanismos moleculares que los causan, o el efecto de la mutación de PSEN1 se ve afectado por la interacción con otras proteínas. Ciertamente, los genes comunes relacionados con la neurodegeneración deben considerarse al identificar una posible causa de una enfermedad, independientemente de la enfermedad con la que estén asociados. Los pacientes con ELP, ELA o paraparesia espástica deben ser investigados para detectar mutaciones en PSEN1. En PKD, la filtración, priorización y validación de secuenciación de Sanger identificaron una nueva variante c.C316T p.Q106* en PRRT2 (PRRT2Q106*) como la causa probable de la enfermedad en la familia UGM478. Los datos clínicos de la familia apoyan el diagnóstico de PKD. La evaluación de los resultados de WES conduce a una fuerte sospecha de PRRT2Q106* como mutación causante de la enfermedad. Las mutaciones en PRRT2 son la única causa conocida de PKD hasta el momento y, a menudo, son mutaciones truncadas que conducen a una haploinsuficiencia debido a la destrucción del transcripto portador de PTC por la vía NMD. PRRT2Q106* no se encontró en ninguna base de datos, por lo que los únicos datos de frecuencia se obtuvieron a través de nuestro ensayo ASPCR para una población de control de 192 muestras. Ninguno de ellos portaba esta variante, sin embargo, se segregó con la enfermedad en el pedigrí, no estando presente en ninguno de los miembros de la familia que no tenían PKD. De acuerdo con los resultados previos, se encontraron niveles de ARNm significativamente más bajos para las variantes con PTC (PRRT2Q106*, PRRT2Q163*, PRRT2Q250*), en comparación con el tipo silvestre (PRRT2WT), en un modelo celular con PRRT2 y sus variantes sobreexpresadas. PRRT2Q163* y PRRT2Q250* se eligieron como controles, siendo variantes descritas previamente en PRRT2. La inhibición de la ruta NMD, por el tratamiento de células SH-SY5Y transfectadas con NMDI14, aumentó los niveles de ARNm para PRRT2Q106* y PRRT2Q163* y mostró una tendencia creciente para PRRT2Q250*. Esto sugiere que la vía de la NMD puede ser la culpable de la desintegración del ARNm provocada por las PTC en las variantes estudiadas. Curiosamente, los niveles de proteína de la nueva variante PRRT2Q106* eran indetectables con WB antes y después del tratamiento con NMDI14, mientras que las otras variantes estudiadas (PRRT2Q163* y PRRT2Q250*) tenían niveles de proteína significativamente más bajos que el PRRT2WT antes del tratamiento y niveles aumentados después. Esto puede deberse a que las regiones ricas en prolina son importantes para la estabilidad de la proteína, ya que PRRT2Q106* tiene una PTC antes de esa región y PRRT2Q163* y PRRT2Q250* en el medio y después de ella. Estos resultados sugieren que la nueva variante PRRT2Q106* es probablemente la causa de PKD en la familia española UGM478. Los mecanismos moleculares responsables de la aflicción pueden ser la vía NMD que causa la degradación del transcripto que conduce a la haploinsuficiencia. La falta de PRRT2 a su vez provoca hiperexcitabilidad a través de la liberación desregulada de neurotransmisores y la hiperactividad de los canales de Na+. Mecanismos moleculares patológicos comunes, o relacionados, pueden afectar diversos trastornos neurológicos tradicionalmente considerados como no relacionados, en la intrincad

CMOS Readout Circuit Integrated with Ionizing Radiation Detectors

This paper describes the work performed in ITE on integration in one CMOS chip the ionizing radiation detectors with dedicated readout electronics. At the beginning, some realizations of silicon detectors of ionizing radiation are presented together with most important issues related to these devices. Next, two developed test structures for readout electronics are discussed in detail together with main features of non-typical silicon process deployed.

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Microvesicles released from ectopic endometrial foci as a potential biomarker of endometriosis

Objectives: Angiogenesis is engaged in endometriosis. It is regulated by regulatory factors and cytokines, transported in microvesicles. The purpose was to investigate the presence of MVs with vascular endothelial growth factor (VEGF) and metalloproteinase-9 (MMP-9) in peripheral blood and peritoneal fluid of women operated on for endometrioma or teratoma Material and methods: Microvesicles (MVs) were determined in blood samples and peritoneal fluid samples collected from women aged 20–60 years operated on for endometriosis (test group) and teratoma (control group). The final investigations were performed on 47 patients, who qualified for the study based on the meticulous inclusion criteria. MVs were analyzed by flow cytometry (FACS) using annexin V, antibodies for molecules characteristic of cells from endometriosis foci (keratin 18 (K18), CD105, CD146), and antibodies for intraepithelial vascular growth factor VEGF and metalloproteinase-9 (MMP-9). The sample was double “reading” using flow cytometry (FACSCantoII).  Results: Cytometry analysis confirmed MVs’ presence in plasma and peritoneal fluid collected from patients with both endometriosis and teratomas. A statistically significant higher level of AnnexinV (+) MVs were observed in plasma samples of endometriosis patients. In the control group, there was a higher percentage of double-positive VEGF (+)/MMP-9 (+) and single MMP-9 (+) positive MVs in the serum. In the peritoneal fluid higher frequency of double-positive VEGF (+)/MMP-9 (+) MVs were found in the control group. However, the amount of VEGF (+) / MMP-9 (+) MVs object did not enable to differentiate between the test and control groups. The study was the first, in which MVs were confirmed in plasma and peritoneal fluid in benign adnexa tumors.  Conclusions: Microvesicles are present in peripheral blood and peritoneal fluid samples collected from patients with endometriosis and teratomas. Microvesicles with proangiogenic factors (VEGF and MMP-9) are more abundant in blood and peritoneal fluid samples from patients with teratomas

Pelvic venous insufficiency — an often-forgotten cause of chronic pelvic pain

Chronic pelvic pain is a common health problem that afflicts 39% of women at some time in their life. It is a common challengefor gynecologists, internists, surgeons, gastroenterologists, and pain management physicians. Pelvic venous insufficiency(PVI) accounts for 16–31% of cases of chronic pain but it seems to be often overlooked in differential diagnosis. The aim ofthis article was to summarize current data concerning PVI. The embolization of insufficient ovarian veins remains the goldstandard of therapy but the optimal procedure is yet to be determined. Well-designed randomized trials are required toestablish the best treatment modalities

PROTEUS – Creating Distributed Maintenance Systems through an Integration Platform

International audienceThis paper is based on the results from the project PROTEUS sponsored by the French Ministry of Economy, Finance and Industry and the Federal Ministry of Education and Research of Germany under the label of European Commission Initiative ITEA. It presents the architecture and the basic concepts of an integration platform, which constitutes the framework of systems implementing the tasks dedicated to remote maintenance, as well as other applications, for large and medium scale industrial installation. The approach illustrated here is useful for executing any maintenance strategy by implementing the relevant means for controlling workflow between several system components as well as the component's integration itself. The paper first points out the need for designing such a maintenance-oriented platform, continues with a requirements analysis to a global maintenance system followed by the description of the fundamentals of a maintenance application integration system. Finally a sample implementation of a maintenance scenario is given

Relaxation phenomena in adiabatic temperature changes near magnetostructural transitions in Heusler alloys

The relaxation processes of the adiabatic temperature changes (ΔTad) at the phase transitions in Ni45Mn43CoSn11, Ni50Mn36.5In13.5, and Ni50Mn35In14.25B0.75 Heusler alloys with different magnetic structures have been studied using a direct extraction method in magnetic fields up to 14 T. It has been found that ΔTad exhibits short relaxation times (less than 10−1 (s)) in the vicinity of the second order phase transitions at the Curie temperatures. The relaxation times of the first order martensitic transitions strongly depend on the latent heat of the transition and can be characterized by a logarithmic law

Building Conceptual Models by Knowledge Management Methodology

Colloque avec actes et comité de lecture. internationale.International audienceThe article proposes to use an alternative approach to design and validation processes of loosely integrated distributed co-operating systems. The example of such a process constitutes the technological background of ITEA project PROTEUS. One of the major technical challenges of PROTEUS project consists in the development of a platform which would facilitate the integration, without major functional modifications, of existent software tools which originally are not designed to work in co-operation. The tools cannot be modified profoundly solely in view of their integration, only a supplementary layer of data interpretation can be introduced. The fact that the tools mustn't be modified in order to follow the integration requirements creates the need of a top level description. Commonly used UML[1] representation of overall tool service is not sufficient to provide distributed view on the co-operation scenarios. Most naturally the UML description is the best adapted when one attempts to obtain a semi automatic code generation. Yet, the UML description is not sufficient for formal verifications such as functional consistency proofs. In order to conciliate the divergent criteria it is proposed to use a higher level description language. This article intends to show the potential of knowledge management methodology used to build conceptual models of domains as a means for integration of UML representations of distributed systems

Azimuthal anisotropy of charged jet production in root s(NN)=2.76 TeV Pb-Pb collisions

We present measurements of the azimuthal dependence of charged jet production in central and semi-central root s(NN) = 2.76 TeV Pb-Pb collisions with respect to the second harmonic event plane, quantified as nu(ch)(2) (jet). Jet finding is performed employing the anti-k(T) algorithm with a resolution parameter R = 0.2 using charged tracks from the ALICE tracking system. The contribution of the azimuthal anisotropy of the underlying event is taken into account event-by-event. The remaining (statistical) region-to-region fluctuations are removed on an ensemble basis by unfolding the jet spectra for different event plane orientations independently. Significant non-zero nu(ch)(2) (jet) is observed in semi-central collisions (30-50% centrality) for 20 <p(T)(ch) (jet) <90 GeV/c. The azimuthal dependence of the charged jet production is similar to the dependence observed for jets comprising both charged and neutral fragments, and compatible with measurements of the nu(2) of single charged particles at high p(T). Good agreement between the data and predictions from JEWEL, an event generator simulating parton shower evolution in the presence of a dense QCD medium, is found in semi-central collisions. (C) 2015 CERN for the benefit of the ALICE Collaboration. Published by Elsevier B.V. This is an open access article under the CC BY license (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/).Peer reviewe